梨是我國(guó)的第三大果樹樹種，我國(guó)是世界*大梨生產(chǎn)國(guó)，栽培面積和產(chǎn)量分別占全球的71.6%和75.8%。但是我國(guó)梨果的出口量和出口價(jià)格都遠(yuǎn)低于日本、韓國(guó)等亞洲國(guó)家，在國(guó)際市場(chǎng)上的競(jìng)爭(zhēng)力較弱，其主要原因是由于我國(guó)梨果的綜合品質(zhì)較差。在眾多影響果實(shí)品質(zhì)的因素中，石細(xì)胞是梨果實(shí)中特有的性狀，也是影響果實(shí)食用口感和加工品質(zhì)的重要因素之一。消費(fèi)者對(duì)梨果實(shí)石細(xì)胞的感知，就是吃到嘴里有沙粒樣的口感，當(dāng)石細(xì)胞含量多時(shí)就會(huì)感覺果實(shí)肉質(zhì)粗糙。因此，對(duì)石細(xì)胞形成機(jī)制的深入解析，能為改良梨果實(shí)品質(zhì)提供重要的理論基礎(chǔ)，更有助于提升梨果的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力。

　　近日，Plant Biotechnology Journal以封面論文發(fā)表了南京農(nóng)業(yè)大學(xué)梨課題組題為 PbrmiR397a regulates lignification during stone cell development in pear fruit 的研究論文。該研究明確了PbrmiR397a通過(guò)轉(zhuǎn)錄后調(diào)控PbrLAC抑制漆酶基因表達(dá)，從而影響石細(xì)胞主要組分木質(zhì)素的合成，*終影響果實(shí)石細(xì)胞的含量；研究還發(fā)現(xiàn)了PbrmiR397a啟動(dòng)子區(qū)域與石細(xì)胞含量相關(guān)的重要SNP位點(diǎn)，為開發(fā)分子檢測(cè)標(biāo)記和輔助育種奠定了基礎(chǔ)。

　　本研究發(fā)現(xiàn)，梨果肉石細(xì)胞在盛花后21-49天迅速形成并積累，并且石細(xì)胞中木質(zhì)素一旦合成就不會(huì)被降解。過(guò)量表達(dá)PbrmiR397a或者同時(shí)抑制三個(gè)PbrLAC基因，都會(huì)引起瞬時(shí)轉(zhuǎn)化的梨果實(shí)木質(zhì)素含量顯著減少。過(guò)量表達(dá)PbrmiR397a的轉(zhuǎn)基因煙草植株和野生型相比生物量之間沒(méi)有顯著差異，而莖桿木質(zhì)素含量下降了18-29%，但S型/G型木質(zhì)素的比值沒(méi)有發(fā)生改變，組織學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)莖桿維管束細(xì)胞數(shù)量更少、細(xì)胞壁木質(zhì)素自發(fā)熒光較弱且次生細(xì)胞壁更薄。

　　通過(guò)對(duì)60份梨品種資源的重測(cè)序數(shù)據(jù)和果肉石細(xì)胞含量關(guān)聯(lián)分析，在PbrmiR397a前體的啟動(dòng)子序列中發(fā)現(xiàn)了6個(gè)單核苷酸多態(tài)性（SNP）與石細(xì)胞含量性狀高度關(guān)聯(lián)。啟動(dòng)子順式元件分析表明，6個(gè)SNP中有2個(gè)SNP會(huì)引起激素響應(yīng)元件的改變。通過(guò)雙熒光素酶試驗(yàn)證實(shí)，SNP#7改變形成的TCA-元件能夠響應(yīng)水楊酸信號(hào)，從而影響PbrmiR397a及其靶基因PbrLACs的表達(dá)，以及木質(zhì)素的合成。研究發(fā)現(xiàn)不同品種中，PbrmiR397a與PbrLACs的表達(dá)量相反，且與高低石細(xì)胞含量呈顯著相關(guān)性，從而進(jìn)一步證明了梨果實(shí)石細(xì)胞的形成受表觀遺傳調(diào)控。

　　薛程博士為該論文的*作者，南京農(nóng)業(yè)大學(xué)張紹鈴教授課題組的吳俊教授為通訊作者。新西蘭皇家植物與食品研究科學(xué)院姚家龍教授和Andrew C. Allan教授為合作作者。本研究得到了國(guó)家杰出青年科學(xué)基金、國(guó)家梨產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系、江蘇省杰出青年科學(xué)基金和江蘇省“333高層次人才計(jì)劃”的資助。

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