自古以來(lái),農(nóng)業(yè)實(shí)踐實(shí)質(zhì)上是把自然存在的物種馴化與“改良”成符合人類(lèi)需求的生產(chǎn)或生活資料。因此,挖掘作物的符合人類(lèi)新需求的類(lèi)型一直是農(nóng)業(yè)的重要發(fā)展目標(biāo)。禾本科作物玉米作為C4植物,具有高光合效率特性,將太陽(yáng)能轉(zhuǎn)化成淀粉,已成為當(dāng)前世界上種植面積與產(chǎn)量*大糧食作物。利用玉米高產(chǎn)與廣適性?xún)?yōu)點(diǎn),圍繞淀粉代謝途徑開(kāi)發(fā)更多更符合人類(lèi)需求的品種類(lèi)型,進(jìn)一步挖掘其系列功能與用途岐化產(chǎn)品,具有重要的意義與價(jià)值。
近日,中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物科學(xué)研究所與安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)合作,利用基因編輯技術(shù)創(chuàng)制超甜、糯與超甜糯復(fù)合型鮮食玉米育種技術(shù),該研究克服了傳統(tǒng)超甜與糯性玉米育種中僅通過(guò)回交導(dǎo)入少數(shù)已發(fā)現(xiàn)的自然突變的局限,并同時(shí)解決了同一代謝途徑中上游基因?qū)ο掠位蛏衔恍孕?yīng)對(duì)育種選擇的困擾,為高效培育超甜玉米、糯玉米、以及甜糯復(fù)合型玉米品種提供了新的技術(shù)策略,相關(guān)成果以“Super-sweetand waxy: meeting the diverse demands for specialty maize by genomeediting” 為題發(fā)表于國(guó)際主流學(xué)術(shù)生物技術(shù)期刊《植物生物技術(shù)雜志(Plant Biotechnology Journal)》上。
玉米光合同化機(jī)制把太陽(yáng)能轉(zhuǎn)化成化學(xué)能合成的單糖與寡糖運(yùn)輸?shù)阶蚜E呷榧?xì)胞質(zhì)并在蔗糖合酶和和脲苷二磷酸(UDP)葡萄糖焦磷酸化酶作用下水解形成1-磷酸葡萄糖,之后在腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(AGPase)作用下生成淀粉合成的主要底物腺苷二磷酸葡萄糖(ADP-Glucose),Shrunken2(SH2)基因編碼AGPase大亞基,位于淀粉合成途徑的上游,對(duì)下游基因具有上位效應(yīng),突變導(dǎo)致籽粒胚中可溶性糖積累,形成超甜表型,是超甜型玉米育種主要目標(biāo)基因(Greene,T.andHannah,L,1998)。WX基因編碼顆粒結(jié)合型淀粉合成酶(GBSSI),催化生成直鏈淀粉,該酶失活將導(dǎo)致直鏈淀粉合成途徑受阻,在籽粒胚乳與花粉中主要生成支鏈淀粉(Shure,M,1983)。該研究構(gòu)建同時(shí)靶向玉米WX與SH2基因的CRISPR/Cas9基因編輯系統(tǒng),在后代中高效分離SH2與WX單基因與雙基因突變的突變系,從而實(shí)現(xiàn)超甜玉米與糯玉米材料的高效創(chuàng)制,同時(shí),利用玉米單交種特性將雙隱性突變(sh2sh2wxwx)系與單隱性突變(SH2SH2wxwx)雜交,驗(yàn)證了超甜與糯性復(fù)合型玉米的玉米育種途徑。表型鑒定結(jié)果表明,WX基因單隱性突變系(SH2SH2wxwx)支鏈淀粉含量超過(guò)96%,雙隱突變系(sh2sh2wxwx)與單隱突變系(sh2sh2)授粉22天后籽粒可溶性糖含量超過(guò)鮮重10%;進(jìn)一步將創(chuàng)制的雙隱突變(sh2sh2wxwx)株系與單隱突變(SH2SH2wxwx)株系進(jìn)行雜交,該F1果穗上同時(shí)具有超甜型籽粒(sh2sh2wxwx)和糯性籽粒(SH2-wxwx),且經(jīng)鑒定超甜籽粒和糯性籽粒具有1∶3分離比,為穗上甜糯1∶3復(fù)合型鮮食玉米品種,其可溶性糖含量顯著(p<0.05)高于糯性單隱突變。因此,能夠滿(mǎn)足人們對(duì)超甜與糯性復(fù)合風(fēng)味的鮮食玉米的需求。該研究為通過(guò)基因編輯創(chuàng)制鮮食玉米提供了范例,該策略還可拓展到su1、su2、sh1、sh2、sh4、bt1、bt2等諸多基因的利用當(dāng)中,結(jié)合這些突變將可培育具有不同甜糯表型分離比的特用雜交種品種。
中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物科學(xué)研究所2015級(jí)碩士董樂(lè)和安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)2016級(jí)博士生祁顯濤為本文共同*作者,中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物科學(xué)研究所謝傳曉研究員、毛龍研究員及安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)程備久教授為通訊作者。該研究得到了北京市科委重大項(xiàng)目、廣東省重大研究計(jì)劃與中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院創(chuàng)新工程等項(xiàng)目資助。
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